Sau một giấc ngủ dài, Selene tỉnh dậy, và khi phát hiện ra rằng con người đã biết đến sự tồn tại về giống loài của mình - Ma cà rồng và Người sói. Họ đang tiến hành một cuộc chiến tranh toàn diện để tiêu diệt cả hai loài bất tử này. Selene quyết tâm tìm cách chiến đấu để bảo vệ giống loài…

Sau các sự kiện của phần phim trước, Selene phải che giấu tung tích Eve, con gái của mình, bởi dòng máu lai đặc biệt mà cô bé nắm giữ. Quá chán nản tình cảnh bị săn đuổi bởi cả 2 giống loài nhằm sử dụng máu của cô để trở nên mạnh hơn, Selene cùng 2 đồng minh mới là David và cha của anh, Thomas, quyết định chấm dứt cuộc chiến kéo dài hàng trăm năm giữa Người sói và Ma cà rồng dù cái giá phải trả có thể là mạng sống của cô.